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临床合理用药2009年8月第2卷第15期 ChinJofClinicalRationalDrugUse,August2009,Vol12No115

#论 著#

高危型人乳头瘤病毒DNA载量在宫颈病变中的应用

梁雯

=摘 要> 目的 探讨高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)的载量在宫颈病变诊断中的应用价值。方法 246例21~69岁妇女采用第2代杂交捕获试验(HC2)进行HPVDNA检测,病毒载量由样本的相对光单位(RLU)与标准阳

性对照(PC)之比来衡量。根据HR-HPV检测值将RLU/PC分为阴性(<1)、低度载量(1~9)、中度载量(10~99)和高度载量(\100)。宫颈病变按照病理诊断分为宫颈炎、CINÑ级、CINÒ~Ó级、宫颈癌(SCC)。结果 随着宫颈病

变程度发展,中、高度载量病例所占比例增加(宫颈炎组30.61%,CINÑ组83.33%,CINÒ~Ó组90.48%,SCC组100%)。结论 宫颈HR-HPV病毒载量是影响宫颈病变及发展的重要因素。

=关键词> 宫颈病变;人乳头状瘤病毒;病毒载量;杂交捕获

=中图分类号> R373.9 =文献标识码> A =文章编号> 1674-3296(2009)15-0022-02

Toevaluatethehigh-riskhumanpapillomavirus(HR-HPV)DNAloadincervicallesions LIANGWen.MaternalandChildHealthHospitalofGuangxi,Nanning530003,China

=Abstract> Objective Todeterminetheusingofhigh-riskhumanpapillomavirus(HR-HPV)loadincervicallesions.Methods Totally246womenaged21~69wereincludedinthisstudy.HPVDNAwasdetectedbyHybridCapture2(HC2),andviralloadwasmeasuredbytheratioofrelativelightunitscomparedtostandardpositivecontro.lRLU/PCwerecategorizedintofourgroups:negative(<1),lowviralload(1~9),mediumviralload(10~99),andhighviralload(\100).Cervicalle-sionswerediagnosedbybiopsiesascervicitis,CINÑ,CINÒ~Ó,andsquamouscervicalcancer(SCC).Results Thepropor-tionofmedium-highviralload(30.61%ofcervicitis,83.33%ofCINÑ,90.48%ofCINÒ~Ó,100%ofSCC).Increasedwiththedevelopmentofcervicallesions.Conclusion ThecervicallesionswashighlyinfluencedbyHR-HPVviralload.

=Keywords> Cervicalintraepitheliallesion;Humanpapillomavirus;Viralload;Hybridcapture 本文通过分析246例高危型人乳头瘤病毒(HR-HPV)的检查结果,根据病毒DNA载量分为低度、中度、重度,以病理检查结果作为金标准,评价HR-HPV在宫颈病变中的应用价值。1 资料与方法

1.1 研究对象 2008年6月-2008年12月我院有246例患者进行HPV-DNA第2代杂交捕获试验(HC2),检出阳性病例89例,均行电子阴道镜下病理活检或宫颈锥切送病检。年龄21~69岁,其中21~30岁37例,31~40岁33例,41~50岁10例,51~60岁6例,60岁以上3例。

1.2 方法 标本采集均使用一次性取样器插入宫颈管顺时针方向旋转5~8圈,取颈管分泌物装入特制保存液中,采用美国Digene公司提供的试剂盒,通过基因捕获技术(HC2)检测HPV-DNA16、18、31、33、35、39、45、51、52、56、58、59和68。1.2.1 实验步骤:(1)样本DNA双链被释放并分解成为可以杂交的核苷酸单链;(2)DNA单链与RNA组合探针结合为RNA-DNA杂和体;(3)特异性抗体将RNA-DNA杂和体捕获并固定在试管壁上;(4)耦联有碱性磷酸酶的第二抗体与RNA-DNA杂和体结合;(5)碱性磷酸酶使底物发光,判读光电强弱可确定碱性磷酸酶的含量,从而确定RNA-DNA杂和体含量。1.2.2 病毒载量的测定:样本产生的光由DML2000微孔板判读器来测量,表达为相对光单位(RLU)。通过其与设置的标准阳性对照(PC)之比来判定结果。当比>1.0时,认为HPVDNA检测阳性,反之<1.0时为阴性。根据HR-HPV检测值将

: ,入组时病毒载量分为3组,低病毒载量组RLU/PC=1~9,中

病毒载量组RLU/PC=10~99和高病毒载量组RLU/PC\100。组织病理学采用CIN分级。

1.3 统计学方法 计数资料以率表示,采用V2检验,P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1 年龄与HR-HPV阳性及患病率的关系 在89例HR-HPV阳性病例中,21~30岁年龄组所占比例最高占41.57%,其次是31~40岁组占37.08%,2组合计占78.65%。41~50岁占11.24%,51~60岁占6.74%,2组合计占17.98%。246例被检测患者中,21~40岁占197例,阳性70例,患病率35153%;41~60岁45例,阳性16例,患病率35.56%,2组患病率比较差异无统计学意义(P>0.05)。

2.2 HR-HPV载量结果与病理检查的关系 89例HR-HPV

载量阳性患者,病理检查结果是宫颈炎49例,CINÑ级18例,CINÒ~Ó级21例,SCC1例。89例HR-HPV载量阳性患者中,低度载量39例,中度载量18例,高度载量32例。在宫颈炎组中,HR-HPV载量低度34例,中度载量7例,高度载量8例;CINÑ级中,低度载量3例,中度载量5例,高度载量10例;CINÒ~Ó级中,低度载量2例,中度载量6例,高度载量13例;SCC1例属高度载量。宫颈炎组中、高度载量占30.61%,CINÑ级占83.33%,CINÒ~Ó级占90.48%,SCC组100.0%。由此可见宫颈病变级别逐渐加重,病毒载量增加。3 讨 论

颈H隐性、亚,且HPV培